多數蝙蝠利用從喉頭發出的超聲脈沖來定位,即回聲定位。具有回聲定位能力的蝙蝠能產生短促且頻率高的聲脈沖,這些聲波在遇到物體會反射回來,蝙蝠能聽到反射回來的回聲,進而確定獵物或障礙物的位置和大小。

回聲定位要求蝙蝠具有高靈敏度的耳和發聲中樞與聽覺中樞的緊密結合,因此少數蝙蝠依靠嗅覺和視覺找尋食物。
回聲定位可以使蝙蝠在夜間或昏暗的環境中,占據鳥類食蟲無法利用的生活領域。
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